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los grupos GFP negativos se volvieron lo suficientemente grandes para la dispersión (20 células), que luego se separaron de células de mES GFP positivas a mano con un microcapilar bajo un microscopio de fluorescencia. Las células se disociaron y expandieron alternando la disociación mecánica y la digestión con tripsina al 0,05% (Invitrogen). Inmunofluorescencia y tinción con fosfatasa alcalina. Se realizó tinción de inmunofluorescencia indirecta en células que crecían en placas de cultivo tisular de 4 pocillos como se describió previamente2, 5.

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Los agregados se sembraron en MEF tratados con mitomicina C y se cultivaron en medio de crecimiento de células mES hasta que Parka Woolrich Outlet

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del sur de Florida', dijo Mark Gale, director ejecutivo / director de aviación del Departamento de Aviación del condado de Broward, operador del aeropuerto durante las festividades de lanzamiento. 'El impacto económico de esto se espera que sea tremendo.

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